要点
问题先天性巨细胞病毒感染(cCMV)相关的发展在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL) ?
发现在本病例对照研究使用新生干血滴1189病例和4756匹配控制,没有显著差异的几率cCMV感染比较所有情况和匹配控制。然而,cCMV感染的几率在超二倍体的所有病例大大增强与无与伦比的控制。
意义这些发现表明混合的证据之间的关联先天性巨细胞病毒感染,特别是超二倍体的疾病,和持续的研究是十分必要的。
重要性急性淋巴细胞白血病(ALL)是最常见的儿童癌症,和儿童死亡的主要原因。了解儿童的原因都是必要的,使早期检测和预防;先天性巨细胞病毒(cCMV)最近被认定为一个潜在的moderate-to-strong因素与风险相关联。
客观的比较cCMV感染的患病率之间的所有情况和匹配控制。
设计,设定和参与者在这个以人群为基础的病例对照研究的病例和匹配控制,案件由0到14岁儿童在1987年和2014年之间的所有诊断识别通过密歇根州密歇根癌症监测项目和出生在10月1日或之后的1987年。癌症控制被密歇根BioTrust对年龄、健康和匹配性,和母亲的种族和民族。从11月到2022年5月的数据进行了分析。
曝光cCMV感染以定量聚合酶链反应在新生儿干血滴。
主要结果和措施在0到14岁儿童诊断。
结果总共有1189病例和4756匹配控制都是包括在这项研究中。Bloodspots出生时收集到的参与者,3425(57.6%)的参与者是男性。cCMV检测在6例(0.5%)和21控制(0.4%)。cCMV感染的几率没有区别比较所有情况和控件(优势比,1.30;95%可信区间,0.52 - -3.24)。Immunophenotype可供536例(45.1%)和细胞遗传学数据为127 (27%)。当分层亚型特点,超二倍体的所有(74例)与6.26倍的几率cCMV感染与无与伦比的控制(95% CI, 1.44 - -27.19)。
结论和意义在这个病例对照研究cCMV和儿科,cCMV与超二倍体的风险增加有关。这些发现鼓励继续研究。
急性淋巴细胞白血病(ALL)是最常见的儿童癌症,占近20%的恶性肿瘤诊断的人20岁以下。1,2高度渗透的遗传倾向,如唐氏综合症,导致在不到5%的情况下。3环境风险因素也被建议,如暴露于电离辐射,但证据不确凿。4,5很大程度上,大多数情况下的原因仍然未知。
最近,巨细胞病毒(CMV)已成为一个潜在的危险因素。巨细胞病毒是疱疹病毒家族的一员(疱疹5)并能经胎盘的感染在怀孕期间。在弗朗西斯的报告等,6先天性巨细胞病毒感染(cCMV)在以人群为基础的评估新生儿干血滴样本(DBS)从268年在加州所有病例和270例对照。总的来说,cCMV中检测出所有病例的9.7%,但只有3.0%的控制非常重要的优势比(或)为3.71 (95% CI, 1.71 - -8.95)。在第二项研究Wiemels等,7先天性和早期生活,临床上公认、巨细胞病毒感染和随后的所有瑞典以人群为基础的注册中心进行调查。血液恶性肿瘤的风险比(人力资源)与任何医学记录cCMV或儿童早期生活获得巨细胞病毒为11.2 (95% CI, 5.8 - -21.5)。
在一起,前2研究表明产前童年巨细胞病毒感染的风险大大增加。如果这是真的,先天性和早期感染巨细胞病毒可能代表首先可改变的危险因素为儿童。作为普遍的新生儿筛查cCMV正在开发中,重要的是要建立通过复制是否出生时巨细胞病毒感染是一个风险因素。因此,本研究评估了cCMV和童年的风险之间的联系。
先天性巨细胞病毒感染是在以人群为基础的病例对照研究评估通过密歇根BioTrust卫生(MBH)。MBH是密歇根卫生和人类服务部计划,监督使用剩余的新生儿出生后不久DBS收集日常联系的DBS出生和癌症登记库。案件由0到14岁的儿童在1987年和2014年之间的所有诊断(肿瘤国际疾病分类,第三版代码形态学9835,9836年和9820年)发现通过密歇根州密歇根癌症监测项目和出生在10月1日或之后的1987年。细胞遗传学和分子数据情况下是抽象通过与密歇根七大儿童医院合作搬运工的仪器编程。控制被MBH选择和匹配4:1出生年份,性别,种族和民族和母亲的报道。匹配性和母亲的种族和民族是有效控制的混杂而出生年份是匹配等价windows的接触。出生特征数据,得到了母亲的种族和民族从链接到先前确定的出生登记,包括风险因素。8,9由于MBH抑制规则的数据,任何潜在的健康信息,比如出生年或母亲和父亲的年龄分类。万博manbetx平台首页机构审查委员会批准的这项研究是明尼苏达大学和密歇根州BioTrust健康。儿童的父母提供知情同意与可用DBS MBH使用DBS在研究。知情同意是不需要为这个研究没有联系的情况下或控件附加信息。万博manbetx平台首页本研究报告后加强流行病学观察研究(的报告选通脉冲)为观察性研究报告指南。
检测巨细胞病毒DNA DBS进行描述,10做了一些调整。一个6毫米,相当于28.272毫米的区域,从新生儿DBS卡由MBH提供。DNA提取使用GenTegra GenSolve DNA完整的工具包(GenTegra LLC)。短暂,6毫米穿孔609μL溶解溶液混合(GenTegra)和11μL蛋白酶K(20毫克/毫升)和孵化56°C与搅拌1.5小时在1400 rpm。样品被转移到一个篮子和离心机旋转恢复解决方案(GenTegra)。其次是DNA纯化后,制造商的协议(GenTegra)。样本筛选了50μL洗脱缓冲和储存在−20°C。
定量多重PCR进行描述。11短暂,7μL洗出液用于反应体积35μL使用LightCycle 480 PCR系统(罗氏)。CMV-immediate早期基因的引物和探针用于神经母细胞瘤ras病毒致癌基因相同器官(国家管制当局方面),在同一反应的看家基因确认恢复amplifiable DBS的DNA。PCR是一式三份,样品被认为是积极的,如果至少2 3复制是积极的。4例(0.3%)和13控制(0.3%)没有足够的基因组DNA的产量(gDNA),以国家管制当局方面,从星展银行和cCMV得分是不确定的。三个控制DBS(0.1%)有巨细胞病毒DNA低于预定的检测极限阈值,得到模棱两可的。巨细胞病毒的副本被表示为拷贝/毫升的血液和副本/μg基因组DNA,如前所述。11gDNA量是衡量国家管制当局方面和表达为皮克/ PCR反应(pg / PCR反应)。
一个皮尔森χ2测试是用来评估分类数据情况下和控制之间的区别。连续变量进行线性协会所有,如果非线性分类。评估cCMV之间的关联,使用条件逻辑回归构建单变量和多变量模型。多变量模型调整为出生时母亲的年龄,母亲的糖尿病、出生体重、直言孕龄,先天性异常的存在。多变量模型是按年龄分层诊断和亚型。例分析可用的亚型数据是由使用精确匹配和无与伦比的分析方法。所有的对比情况和控制2-sample使用t测试连续变量或培生χ2为分类变量或Fisher精确测试,水平的意义P= . 05。所有统计分析使用占据/ IC (StataCorp LP) 15.1版本。从11月到2022年5月的数据进行了分析。
MBH确认1199例符合条件的所有病例和4796个匹配控制。10例(0.83%)没有DBS可用;因此,匹配设置控制(40)被排除在外。最后研究人群包括1189例病例和4756例对照(表1)。平均年龄(SD)诊断为4.5岁(3.3)。研究人口更大比例的男性儿童(3425[57.6%]),和参与者主要出生在1993年和2002年之间(3205 [53.9%])。所有病例的平均出生体重(SD) (3448.6 [577] g)高于对照组(3385.5 [573]g) (t=−3.39,df= 5943;P<措施)。母亲的绝对年龄是更高的分布在所有情况下,153名(12.9%)有母亲35岁以上与547年相比控制(χ(11.5%)23= 51.83;P<措施)。尽管匹配母亲的种族和民族,一个更高比例的情况下母亲们确认为白色(987[83%])比控制(3959[83.2%])(χ24= 12.43;P= . 01)。没有母亲的教育水平之间的显著差异(χ23= 2.71;P=无误)。出生时父亲的年龄分类病例和控制之间有所不同,与更大比例的列祖之间的35岁以上病例(297[25%])比控制(994[20.9%])(χ23= 10.72;P= . 01)。
均值(SD)怀孕期间体重相近的母亲情况下(31.4[13.9]磅)和控制(31.0[13.4]磅)(t=−0.85,df= 5503;P=点)(表1)。没有明显差异之间的母亲在怀孕期间吸烟或饮酒记录在出生证明(χ22= 0.08;P=。96and χ22= 0.21;P=。90,respectively). There was a slightly higher prevalence of prepregnancy or gestational diabetes among mothers of cases (49 participants [4.1%]) than controls (153 participants [3.2%]), but this difference was not significant (χ21= 2.37;P=点)。在控制中,有一个略高患病率怀孕期间子宫或阴道出血(61参与者[1.3%])比情况下,参与者[0.6%])(7(χ21= 4.05;P= .04点)。交货方式和多元化出生相似的情况下和控制(χ24= 3.10;P=。54and χ23= 4.04;分别为0.26),大多数单身生育(98%,病例和控制)和自发的阴道分娩(812名参与者(68.3%)和3357名参与者(70.6%),分别)。有一个先天性异常的患病率明显高于在所有情况下(40参与者[3.4%])与控制(81名参与者[1.7%])(χ22= 25.76;P<措施)。在Kotelchuck索引(χ没有差异25= 8.86;P=厚)。
Immunophenotype可供536(45.1%)的情况下;62(11.6%)的t和474年(88.4%)是b (eTable补充1)。那些immunophenotype更有可能是1997年以后出生(446参与者[83.2%])比失踪immunophenotype(205名参与者[31.4%])(χ24= 399.19;P<措施)。例亚型数据老在诊断(5.4岁)与例失踪亚型(3.8岁)(P<措施)。然而,例,没有亚型类似跨性(307名参与者(57.3%)和378名参与者(57.9%)的男性,分别)和母亲的种族和民族(435名参与者(81.2%)和552名参与者(84.5%)白色,分别)。细胞遗传学数据用于127例(27%)的b。那些细胞生成的子类型,显示了b亚型的分布图1。超二倍体的b是最普遍的亚型(54参与者[58%])紧随其后ETV6-RUNX1易位(29参与者[23%])。
我们发现cCMV DNA在6 1189例的病例(0.5%)和4756年21的控制(0.4%)(表2)。原油的可能性cCMV感染所有病例和控件之间并没有统计上的不同(OR, 1.14;95%可信区间,0.46 - -2.83)。在多变量模型中,cCMV暴露情况下没有差异的几率相对于控件(或调整,1.30;95%可信区间,0.52 - -3.24)。在b的情况下,cCMV出现的几率升高而匹配控制;然而,这一点估计也不严密地测量(OR, 4.0;95%可信区间,0.56 - -28.40)。没有cCMV阳性病例中公认的t。有两个超二倍体的情况下那些亚型数据cCMV积极。 When we compared CMV prevalence among hyperdiploid ALL cases and their matched controls, the model did not converge due to lack of exposure among the matched controls. However, compared with all controls (4756 participants) in an unmatched analysis, hyperdiploid ALL cases (74 cases) were 6.26 times more likely to be CMV positive (95% CI, 1.44-27.19). We also assessed this outcome in an unmatched analysis including all matched controls of cases who had subtype data available (2144 participants) and found that the odds of cCMV exposure were 13.4 times greater among hyperdiploid cases compared with controls (95% CI, 1.25-83.21).
其中阳性cCMV DNA,均值(SD)巨细胞病毒的病毒副本每毫升血液中没有明显不同情况下(35 966.7拷贝/毫升[44 735.1])和控制(34 368.1拷贝/毫升(88 339.6))(t=−0.04,df= 25;P= .97点)(图2)。情况下有较高的意思(SD)病毒载量(3301.3[6576.5]副本/μg)比控制(840.1[1256.2]/μg副本),但这种差异不显著(t=−1.69,df= 25;P= 1)。均值(SD) gDNA量用于每个之间的反应是类似的情况下(43 205 [46 409.6]pg / PCR反应)和控制(56 719 [39 142.9]pg / PCR反应)(t= 0.72,df= 25;P=的相关性)。
在巨细胞病毒感染的分层分析,我们没有发现任何显著关联(表3)。婴儿的母亲有高中以上的学历,巨细胞病毒的流行是在病例和控件(Fisher精确明显不同P= .04点);然而,原油或不显著(OR, 4.97;95%可信区间,0.84 - -34.07)。我们没有发现任何差异在巨细胞病毒感染的几率由母亲的种族和民族,在所有情况下参与者(6)白人母亲。
先天性巨细胞病毒感染已经成为一个潜在的小儿可改变的危险因素。为了应对2现存研究主题的弗朗西斯et al6Wiemels等,7我们进行了一个大型的、以人群为基础的病例对照研究cCMV感染和儿科。1189年整个研究所有病例和4756例对照我们没有检测白血病之间的联系和接触cCMV感染主要分析。然而,在超二倍体的所有情况下,cCMV阳性的可能性大于6倍无与伦比的控制。后在本节中,我们讨论的简短调查cCMV和所有的基础和比较我们的发现与弗朗西斯et al6和Wiemels et al。7
有越来越多的证据表明感染引起的小儿,还有三个主要假设的本质这发病机理:护胫套延迟感染的假说,Kinlen人口混合假说”,史密斯的假设的直接转换的传染病。12- - - - - -15尽管这些假设预期的感染,如巨细胞病毒,为未来的感染、调节免疫系统中现有的假设巨细胞病毒最适合史密斯的的标准,国家传染病造成的所有应具备:(1)能够诱导基因组不稳定性;(2)具体对B淋巴细胞的影响;(3)较低的社会经济地位较高的感染区域;(4)有限公司通用致癌潜能;(5)最小与原发感染症状;(6)能穿过胎盘和胎儿感染,但不引起严重的异常。15
巨细胞病毒能够导致先天性感染直接染色体断裂,可能与其畸形形成的关联属性,16并将几个编码蛋白调节细胞周期控制和宿主DNA损伤反应。17cCMV之间的关系和B淋巴细胞CD34+细胞,早期造血祖细胞在骨髓,18,19和巨细胞病毒的细胞类型建立延迟。一项研究et al。阿尔巴诺20.调查的影响cCMV在脐带血造血祖细胞浓度,发现与cCMV感染婴儿,CD34+细胞数量约2.6倍的匹配控制。这表明一种机制,通过这种机制cCMV增加所有的风险通过鼓励增殖的细胞容易转换。总的来说,这些观察支持巨细胞病毒的合理性参与的原因。除了这个合理性2独立研究表明cCMV感染之间的关联。6,7
弗朗西斯的最初的研究等6有一个与我们的研究设计最相似。新生儿DBS的作者进行了病例对照研究268例和270年癌症控制。相比之下,我们的病例对照研究是近10倍,同样强劲,以人群为基础的研究设计用新生儿DBS捕捉产前巨细胞病毒暴露。巨细胞病毒DNA的利率2研究积极性是不同的,与积极的患病率高7.5倍弗朗西斯等的控制6相比之下,我们的控制。这就提出了一个技术差异的可能性。一个主要的区别是弗朗西斯等使用6液滴数字PCR检测巨细胞病毒DNA,而我们使用定量PCR方法优化检测新生儿DBS的巨细胞病毒DNA。11尽管滴数字PCR已被证明有增加精度定量PCR在某些应用程序中,也有类似的灵敏度的方法。21,22然而,污染物来源于Guthrie卡可能影响的敏感性定量PCR分析。另一种可能性是起始物料的数量的变化。弗朗西斯等6报道使用四分之一Guthrie现货,相当于33.2毫米2区域,超过了穿孔面积28.272毫米用于我们的学习。23因此,检测的可能性cCMV与材料取样的数量可能会增加。虽然我们不确定是什么推动巨细胞病毒DNA患病率的差异在出生2研究cCMV感染中发现0.45%的新生儿DBS,这与我们的研究结果是一致的。11此外,高收入国家普遍筛查显示cCMV患病率一直是0.6%。24,25
一个突出的问题是cCMV的严重程度是否与未来相关的所有风险。在Wiemels等,7先天性和早期感染巨细胞病毒是未来血液恶性肿瘤的风险评估基于注册的瑞典。通过被动筛选、临床公认的巨细胞病毒感染的患病率在noncases出生时是0.0066%,0.088%的孩子后来接受了血液恶性肿瘤的诊断(HR 14.8;95%可信区间,4.8 - -45.9)。先天性巨细胞病毒感染是临床公认在10% -15%的感染婴儿,婴儿的多数无症状。26,27因此,巨细胞病毒感染调查在Wiemels等可能是严重的。28我们不知道是谁在我们的研究中有一个临床公认cCMV感染;然而,我们观察到巨细胞病毒水平较高的情况下与控制。进一步调查这个协会是必要的。
我们的研究结果表明CMV-ALL协会可能针对超二倍体的所有,从诊断标本符合最近的报告。29日细胞生成的子类型是用于21%的病例。当所有子类型分层时,我们发现超二倍体的所有情况下6.26的几率cCMV相比,所有控件都在我们的研究中,虽然只有2暴露情况。此外,超二倍体的情况下有13.4的几率cCMV相比,与亚型数据情况下的所有控件。高超二倍体的所有染色体(通常定义为50 - 67)最近所示由格兰特与巨细胞病毒等29日在欢迎分析。一半的骨髓活检是巨细胞病毒DNA阳性,从b细胞和骨髓活检病例相比更容易巨细胞病毒阳性与t细胞(或1.63;95%可信区间,0.88 - -3.06)。考虑到切片b细胞,从高超二倍体的所有病例可能巨细胞病毒阳性比的1.7倍ETV6-RUNX1,2.71倍的上tertile CMV-load (95% CI, 1.34 - -4.73)。29日我们的研究结果,结合从格兰特et al,强烈建议巨细胞病毒专门超二倍体的所有有关。
我们的研究有几个优势。首先,本研究是一个非常大的,以人群为基础的病例对照研究1189例和4756控制,所有与DBS出生后立即获得,和之前的研究近10倍。第二,数据链接通过MBH出生特色使我们检查潜在的关联和父母的人口和白血病。最后,使用嵌套样本出生后不久做出测量之间的暂时性cCMV和发展的清晰。由于样本收集出生后,任何检测DNA通过在子宫内。此外,这是一个优势Wiemels等的研究,因为他们使用的医疗记录,只报道临床公认的巨细胞病毒疾病。
限制我们的研究在很大程度上是这是一个白人,而有限的我们看子组定义为人口的能力。另一个限制是密歇根DBS存储环境温度,DBS标本收集2009年之后在弗朗西斯的研究等6在−20°C。这可以解释为什么我们有一个低患病率的巨细胞病毒DNA,但环境温度以前没有降低质量30.我们估计患病率与其他报告是一致的。31日此外,immunophenotype和细胞遗传学亚型可供一小部分的情况下导致不精确的估计。
这个病例对照研究没有发现cCMV感染与小儿的证据在我们的主要分析。然而,我们发现一个超二倍体的所有情况下使用小型数字之间的联系。部分支持cCMV协会所有,之前在2流行病学研究,它的积累生物合理性建议继续研究的必要性。明尼苏达州和安大略地区最近发起全民cCMV筛选,可能存在地区进一步研究这一新兴协会。32,33未来的工作也可以考虑将DNA甲基化来帮助建立一个机械cCMV之间的联系。最后,工作还认为儿童早期感染需要理解这种流行病毒之间的关系。
发表:2022年10月21日。
发表:2023年1月9日。doi:10.1001 / jamanetworkopen.2022.50219
开放:这是一个开放的分布式根据文章CC-BY许可证。©2023 geri JM et al。狗万体育下载地址《美国医学会杂志》网络开放。
通讯作者:詹妮弗·m·格雷博士英里每小时,流行病学和临床研究分工,明尼苏达大学儿科学系420年特拉华圣,明尼阿波利斯,MN 55455 (grimm074@umn.edu)。
作者的贡献:盖瑞博士已经完全访问所有的数据研究和负责数据的完整性和数据分析的准确性。
概念和设计:盖瑞,Schleiss Hooten,斯佩克特,纳尔逊。
数据的采集、分析或解释:所有作者。
起草的手稿:盖瑞,Schleiss Hooten,狄更斯,斯佩克特。
关键的修订手稿的重要知识内容:所有作者。
统计分析:盖瑞,Schleiss Hooten,斯佩克特。
获得资助:Schleiss,威廉姆斯,斯佩克特,纳尔逊。
行政、技术或材料支持:兰格,埃尔南德斯,依然处在样本,狄更斯,Mody、Ravindranath,斯佩克特。
监督:Schleiss Pridgeon,斯佩克特。
利益冲突的披露:盖瑞博士报道接受资助在美国国立卫生研究院(NIH)的行为研究。Schleiss博士报道个人费用从现代化疫苗外提交的工作。埃尔南德斯博士报道期间收到来自美国国立卫生研究院的资助进行的研究。狄更斯博士报道为颞部担任顾问,公司外的提交工作。Ravindranath博士期间接受赠款明尼苏达州大学的报道进行研究。Pridgeon博士报道从明尼苏达大学获得资助的行为研究。没有其他信息披露报告。
资金/支持:Drs纳尔逊和斯佩克特是由国立卫生研究院R01CA228478和儿童癌症研究基金。盖瑞博士是由分子病毒学研究所培训项目的奖学金,明尼苏达大学(NIH T32 AI083196)。这项工作也由国防部(w81xwh - 21 - 1 - 0397 -威廉姆斯博士)。
资助者的角色/赞助商:资助者没有参与这项研究的设计和实施;的收集、管理、分析和解释数据;准备、审查或批准的手稿;并决定提交出版的手稿。
数据共享声明:看到补充2。